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he染色(he染色结果分析)

wangsihai

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he染色是什么意思?

HE染色是一种组织病理的染色方法,通过这个染色可能明确的区分出组织以及细胞的结构,才可能在显微镜下观察组织以及细胞的形态。这在病理诊断中是最常用的染色方法,通过染色可以让人体的组织在显微镜下显示得更清楚。

染色步骤:

石蜡包埋的组织切片必须经过脱蜡水洗处理才能染色,让水溶性染料渗入组织中,含蜡的组织切片无法进行任何染色。

所以,在染色前必须用二甲苯或替换剂进行彻底脱蜡,经过乙醇洗后,再用水洗。即石蜡组织切片→二甲苯→乙醇(无水乙醇,95%,80%)→水。人们通常把这个过程叫做切片脱蜡至水。脱蜡至水是染色前的必须完成的基本步骤。

以上内容参考 百度百科-HE染色

HE染色法的原理及步骤

HE染色原理

HE 染色法为苏木精-伊红染色法,是石蜡切片技术里常用的染色法之一,也是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基础、最广泛的技术方法。

属性为碱性的苏木素染色液可以使细胞着蓝色,为酸性的伊红使细胞着红色,其结果胞核呈蓝色,胞浆呈红色。两种不同的染色液使细胞通过颜色来改变折光率,在光镜下呈现出细胞图像。

HE染色法之所以成为细胞染色最常用的方法是因为HE染色法过程中除化学反应外,还有物理作用中吸附、吸收效果,使HE染色提供良好的核浆对比染色效果。

实验步骤

1、样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次。

2、样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。

3、染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。

4、分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。

5、染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。

6、吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片。

若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。

实验相关用品

1、固定液:常用95%乙醇和冰丙酮

2、苏木精染液:称取苏木精粉0.5g,铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中,然后取NaIO 31g,水5ml,再加入甘油30ml和冰醋酸2ml,混合均匀,滤纸过滤,备用。

3、伊红染液:称取0.5g水溶性伊红染液,溶于100ml蒸馏水中。

4、稀盐酸乙醇溶液:用75%乙醇配制1%盐酸。

5、系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。

6、培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。

实验结果

细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。

HE染色试剂盒常见规格为3 10ml和3 100lm。

he染色步骤

HE染色步骤:

1、脱蜡,脱蜡二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分钟,事先准备好盖玻片。

2、覆水,100%(Ⅰ、Ⅱ)、90%、80%、70%酒精各5分钟,自来水冲洗5分钟×3。

3.、苏木精染色5分钟,根据染色情况,可以适当增加或减少染色时间,流水冲洗。

4、5%乙酸分化1分钟,流水冲洗,用吸管滴加乙酸,布满玻片上的组织即可,分化后颜色变浅了一些,成为蓝色。

5、返蓝:返蓝液,实验室没有,也可不用。

6、伊红染色1分钟,根据染色情况,可以适当增加或减少染色时间,流水冲洗。

7、脱水:70%、80%、90%、100%酒精各10秒,二甲苯1分钟,可以在通风橱自然晾干再封

片,约5分钟左右。

8、滴上中性树胶,封片,用吸管滴上一滴即可,尽量少滴,但压片后要将组织全部覆盖完,避免中间有气泡。

扩展资料:

he染色原理:

易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。

构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。

而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。

所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

参考资料来源:百度百科—he染色

名词解释he染色

HE染色法是石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。HE染色法适用于组织学、胚胎学、病理学教学与科研。

扩展资料:

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

he染色法是指

he染色是一种由碱性染液苏木精和酸性染液伊红构成的一种染色方法。

1、he染色对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性。组织切片苏木素染色、分化与反蓝:将水化后的组织样本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,总共清洗3次。之后用移液枪吸取已经预先配置好的苏木素染色液,每个组织切片滴加100ul,充分染色10min。

2、切片经HE染色后,要彻底脱水透明,才能用中性树胶封盖。he染色对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。

3、着色情况与组织或细胞的种类有关。切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(最佳厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。

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