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引物合成时nmol为1,OD为0.2,怎么稀释
你的引物合成报告单上肯定有每OD含有的DNA的量的。一般来说,如果你定的引物是1OD的话,直接加入每OD×10倍的水,就可以得到100uM的DNA溶液。
用TE(或ddH2O)稀释,按引物合成报告单上写的先稀释到100uM(一般有To dissolved into 100uM,add XX ul water...,不过注意一下是1OD的还是一管的,一般指1OD加这么多),作为贮存液。
生工的报告单上应该有一个加水量,不过那个是每OD的,你对应的加上2倍的无菌水就可以了,然后是100pm的母液,根据实验要求进行进一步的稀释。
nmol/OD×管上所标OD值×100 是为10pmol/ul浓度的引物溶液,还可以由此推算其它浓度所需的双蒸水量。可于-20度保存。
请问引物是怎么稀释的?
通常,会有1OD=?ug的标记(由于引物长度不同,此处数值也对应不同),直接按?值加入等量ddH2O(如20ug对应加入20ul水)便可稀释为1ug/ul最后充分涡旋,使沉淀完全溶解。-20度保存,使用时,应稀释10倍。
一般来说,如果你定的引物是1OD的话,直接加入每OD×10倍的水,就可以得到100uM的DNA溶液。举个例子,比如你的引物是5nmol/OD的,那么加入50μL的水,可以得到100uM的DNA溶液。
用TE(或ddH2O)稀释,按引物合成报告单上写的先稀释到100uM(一般有To dissolved into 100uM,add XX ul water...,不过注意一下是1OD的还是一管的,一般指1OD加这么多),作为贮存液。
合成的引物该怎么处理,用超纯水还是什么稀释
1、rpm离心1min后加入ddH2O,涡旋震荡1min后瞬时离心甩一下即可。加水量根据你需要的浓度确定。
2、一般而言常规pcr引物分两个浓度,一个是高浓度储存液,它是使用浓度的10x,高浓度储备引物用TE溶解;使用浓度的引物用灭菌的ddH2O稀释或溶解。如果只是纯粹的DNA pcr,则使用常规超纯水及其配制的TE缓冲液溶解引物即可。
3、用TE(或ddH2O)稀释,按引物合成报告单上写的先稀释到100uM(一般有To dissolved into 100uM,add XX ul water...,不过注意一下是1OD的还是一管的,一般指1OD加这么多),作为贮存液。
4、生工的报告单上应该有一个加水量,不过那个是每OD的,你对应的加上2倍的无菌水就可以了,然后是100pm的母液,根据实验要求进行进一步的稀释。
为什么要稀释引物
1、如果引物是直接退火连接的话,用TE更好(连接酶要求低离子浓度)。
2、⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时,不出现扩增带,极有可能是标本的消化处 理,模板核酸提取过程出了毛病,因而要配制有效而稳定的消化处理液,其程序亦应 固定不宜随意更改 2。
3、您好,引物合成后会干燥保存,为干粉状态。引物管上的标签一般会标注有加水量,把引物管稍离心后,按照标注加入无菌水即可。根据自己的用途不同稀释成相应的浓度。