二代测序那些事
二代测序原理：分别把 DNA 分子链以一种叫Sanger 方法的方法进行分解，然后再测序，这样就能够得到一条完整的DNA链，从而确定 DNA序列.二代测序技术的优势在于快速、准确、效率高，可以同时测定大量样品。
rTn5转座酶的插入位点具有很高的随机性，因此被广泛的用于体外转基因（外源基因整合到宿主细胞）和二代测序建库等领域。
二代测序又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。关于二代测序的临床应用：二代测序作为一种检测手段，主要应用于基因的生殖变异（遗传性）与体细胞变异（获得性）的检测。
即第二代DNA测序技术。第二代测序技术的核心思想是边合成边测序，即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现有的技术平台主要包括Roche/454 FLX、Illumina/Solexa Genome Analyzer和Applied Biosystems SOLID system。
第二代测序（Next-generation sequencing，NGS）又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。
二代测序原理
二代测序原理：分别把 DNA 分子链以一种叫Sanger 方法的方法进行分解，然后再测序，这样就能够得到一条完整的DNA链，从而确定 DNA序列.二代测序技术的优势在于快速、准确、效率高，可以同时测定大量样品。
原理 二代测序原理也就是文库构建，PCR产生的片段或基因组打断的片段两端需要添加接头修饰才能进行测序。末端修饰。打断的片段是随机断裂，其末端可能是不平的。因此，建库第一步是补齐不平的末端。添加接头。
Illumina/Solexa Genome Analyzer测序的基本原理是边合成边测序。
二代测序又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。关于二代测序的临床应用：二代测序作为一种检测手段，主要应用于基因的生殖变异（遗传性）与体细胞变异（获得性）的检测。
二代测序应用如下：Illumina 原理：桥式PCR+4色荧光可逆终止+激光扫描成像。Roche 454：油包水PCR + 4种dNTP车轮大战 + 检测焦磷酸水解发光。
相比一代测序技术,二代测序技术具有哪些优点
优势：二代测序相比一代测序大幅降低了成本，保持了较高准确性，并且大幅降低了测序时间，将一个人类基因组从3年降为1周以内。
二代测序原理：分别把 DNA 分子链以一种叫Sanger 方法的方法进行分解，然后再测序，这样就能够得到一条完整的DNA链，从而确定 DNA序列.二代测序技术的优势在于快速、准确、效率高，可以同时测定大量样品。
②.二代测序 优点： 一次能够同时得到大量的序列数据，相比于一代测序技术，通量提高了成千上万倍； 单条序列成本非常低廉。
三代测序主要有两种技术：PacBio公司的SMRT和Oxford Nanopore Technologies的纳米孔单分子测序技术，这两种技术的测序读长都可以达到几十kb的级别，远远高于二代测序技术。
什么是基因二代测序?
二代测序又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。关于二代测序的临床应用：二代测序作为一种检测手段，主要应用于基因的生殖变异（遗传性）与体细胞变异（获得性）的检测。
第一代测序：指双脱氧末端终止法，扩增后通过毛细管电泳读取序列，每次获取数据量少。
第二代测序为高通量测序，采用微珠或高密度芯片边合成边测序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次获得数G数据，相对与第三代，都仍然需要扩增的方法放大信号，扩增后再检测。
二代测序技术又称为高通过量测序技术，是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）革命性的改变。二代测序技术的核心思想是边合成边测序，可以一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，所以又被称深度测序。
第二代测序（Next-generation sequencing，NGS）又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。
